Toma de muestras para el control de Legionella en base al RD 487/2022

La toma de muestras es el comienzo del control y prevención de la legionela. Si el muestreo de agua se hace mal, puedes obtener falsos negativos, y creer que todo está bien cuando no lo está.

Con la normativa vigente, el muestreo debe estar planificado dentro del PPCL y cumplir requisitos de puntos de muestreo, frecuencias y protocolo de toma/transporte.

Vamos a verlo todo en este artículo:

Requisitos para la toma de muestras para el control de Legionella: Cambios RD 487/2022 + RD 614/2024

Estos son los puntos que más afectan a la toma de muestras para el control de Legionella y que conviene tener en cuenta:

• El muestreo y el transporte deben ajustarse a lo establecido en el Anexo V (programa de muestreo) y el Anexo VI (protocolo de toma y transporte) del Real Decreto 487/2022, de 21 de junio, por el que se establecen los requisitos sanitarios para la prevención y el control de la legionelosis).
• El RD 614/2024 introduce una aclaración importante y es que la toma de muestras para determinación de Legionella mediante cultivo debe realizarla una entidad o empresa acreditada para ese acto de toma de muestra según UNE-EN ISO/IEC 17025:2017.
• Periodo transitorio hasta el 1/1/2030, se concede plazo para esa acreditación y, mientras tanto, la toma se realiza conforme al Anexo VI.
• La autoridad sanitaria puede cambiar o añadir puntos de muestreo por razones de salud pública.

En el BOE consta la actualización del texto consolidado tras RD 614/2024 (entrada en vigor el 04/07/2024).

Antes de muestrear: Planificación en PPCL

Un muestreo “a ojo” suele fallar por dos motivos: no es representativo y no es comparable en el tiempo. Antes de ir a la instalación, define:

1. Objetivo del muestreo: Ver la colonización de terminales (grifos/duchas) o ver la calidad del circuito (agua circulante).
2. Listado de puntos (depósito, acumulador, retorno si aplica, y terminales).
3. Frecuencia mínima según tipo de instalación (y si hay factores de riesgo, ampliar).
4. Cómo registrar cada muestra para mantener trazabilidad (punto exacto, fecha/hora, tipo de toma, temperatura, biocida, etc.).

El RD exige que la toma se haga según procedimientos documentados dentro del programa de muestreo.

¿Cuántas muestras hay que tomar?

En sistemas de agua sanitaria (ACS/AFS), el muestreo se define por:

• Puntos representativos del sistema (p. ej., depósito, acumulador, retorno si existe).
• Puntos terminales (grifos/duchas), en número mínimo según el tamaño de la instalación.

Tabla de puntos terminales (instalaciones de uso colectivo)

Hospitales, hoteles, residencias, colegios, instalaciones deportivas, etc.

Frecuencia mínima de muestreo de agua

La frecuencia mínima depende del tipo de instalación (tabla de frecuencias del Anexo V del RD 487/2022):

• Sistemas de agua sanitaria (ACS/AFS): Legionella spp. → trimestral.
• Torres de refrigeración / condensadores evaporativos: Legionella spp. → mensual.
• Sistemas de agua climatizada tipo spa/jacuzzi (≥ 24 ºC con aerosolización y recirculación): Legionella spp. → mensual.
• Enfriamiento evaporativo por pulverización: Legionella spp. → semestral.

Cómo elegir puntos de muestreo representativos

Para agua sanitaria, el RD marca mínimos “de base” en cada muestreo (que pueden ampliarse según tamaño/características):

• Un punto en el depósito (si existe).
• Un punto en el acumulador (ACS).
• Un punto en el circuito de retorno (si hay retorno).
• Cada uno de los puntos terminales identificados como puntos de toma.

¿Cómo repartir los terminales?

• Cubre sectores/planta/alas del edificio.
• Prioriza duchas (mayor exposición por aerosol).
• No elijas siempre “el grifo bueno”: incluye zonas alejadas, poco uso y baja circulación.

¿Cómo tomar la muestra de agua?

En puntos terminales (grifos/duchas) hay dos formas y no sirven para lo mismo. Elegir mal aquí es una fuente típica de resultados engañosos.

Sin purga (sin dejar correr el agua)

Objetivo: muestrear el terminal y su tubería, es decir, la posible colonización del propio punto (grifo/ducha).

• Se toma el primer litro nada más abrir.
• Idealmente en un terminal que haya estado unas horas sin uso.
• Se recomienda en: terminales alejados y de poco uso, tramos de baja circulación, mezcladores con temperaturas < 50 ºC, etc.

Con purga (dejando correr hasta temperatura constante)

Objetivo: muestrear el agua del circuito (calidad del agua circulante).

• Se deja correr hasta alcanzar temperatura estable.
• Representa lo que “realmente” está suministrando la red al punto terminal.

Materiales y preparación (kit de muestreo)

Antes de entrar en la instalación, revisa que llevas (y que todo está calibrado si aplica):

• Envases estériles con cierre hermético (y cámara de aire para microbiología).
• Neutralizante específico del biocida (según autorización).
• Termómetro para medir temperatura in situ.
• Medidor de biocida (si procede).
• Nevera portátil / acumuladores de frío.
• Guantes desechables.
• Etiquetas y rotuladores resistentes al agua.
• Herramientas para acceso a puntos (llaves, destornilladores, etc.).

Conservación y transporte al laboratorio

Aquí se pierden muchos muestreos, por un lado, porque el desinfectante sigue actuando si no neutralizas; por otro, porque el tiempo y la temperatura afectan a la recuperabilidad.

• Evita luz y calor durante conservación/transporte.
• No transportar en la misma nevera muestras con temperaturas muy distintas (ej.: 60 ºC con 20 ºC).
• Para Legionella spp. (cultivo), la tabla indica:

Parámetro	Requisito
Ensayo microbiológico	Legionella spp. (cultivo)
Tiempo ideal hasta iniciar el ensayo	< 24 horas
Tiempo máximo admisible	< 48 horas (con conservación refrigerada)
Temperatura de conservación y transporte	Entre 6 y 18 ºC
Volumen mínimo de muestra	1.000 ml
Observación importante	Superar las 24 h puede reducir la fiabilidad del resultado

El propio RD advierte que el tiempo entre toma y análisis puede reducir la fiabilidad y debe ajustarse a los requisitos de la tabla.

Registro de la toma de muestras para el control de Legionella: ¿Qué datos anotar?

Un buen muestreo sin un buen registro es casi inutilizable (no puedes comparar series ni actuar con precisión). Incluye al menos:

• Identificación de instalación/ubicación
• Punto exacto (planta, ala, baño X, ducha Y, retorno, acumulador, etc.)
• Fecha y hora
• Tipo de toma: sin purga / con purga
• Temperatura medida in situ (y si hubo estabilización)
• Biocida: tipo y medida in situ (si aplica)
• Observaciones: terminal poco usado, incidencias, reformas, etc.

El RD 614/2024 refuerza la idea de correlación entre planificación, documento de toma, condiciones de transporte, resultados y medidas correctoras.

Errores típicos que generan falsos negativos en los muestreos

• Purgar cuando querías “sin purga”: arrastras el “pico” del terminal y baja la probabilidad de detectar colonización.
• No neutralizar el desinfectante: el biocida sigue actuando dentro del bote y “mata” la muestra.
• Mal control del tiempo/temperatura: calor/luz o retrasos → menor recuperabilidad.
• Muestrear puntos poco representativos (siempre los mismos y siempre “buenos”).
• Etiquetado/registro pobre: luego no sabes dónde actuar ni puedes repetir el muestreo de forma comparable.
• Contaminación cruzada (botes no estériles, guantes sucios, manipulación).

¿Qué pasa si sale Legionella?

Las medidas concretas dependen del tipo de instalación y del PPCL/PSL, pero el RD incluye medidas en función del recuento. Como orientación general (ACS/AFS):

• No detectado o < 100 UFC/L: mantener programas actuales.
• ≥ 100 y < 1.000 UFC/L: revisar programas y aplicar medidas correctoras; puede incluir limpieza/desinfección del tramo/puntos implicados y nueva toma entre 15–30 días tras L+D según el caso.
• ≥ 1.000 UFC/L: revisión inmediata del PPCL, medidas correctoras incluyendo L+D del sistema y nueva toma entre 15–30 días; si es necesario, parar la instalación e informar a usuarios.

Importante: La autoridad sanitaria puede dictaminar modificaciones según localización de los puntos y riesgo.

Checklist rápida: Toma de muestras para el control de legionella

• ☐ ¿Objetivo definido? (terminal sin purga vs circuito con purga)
• ☐ Envase estéril + neutralizante correcto
• ☐ Volumen correcto (1.000 ml para Legionella)
• ☐ Etiquetado completo + registro del punto exacto
• ☐ Transporte en rango y sin mezclar temperaturas muy distintas
• ☐ Entrega al laboratorio para iniciar ensayo: Menos de 24 horas es lo ideal

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Y si necesitas que el muestreo sea conforme a la normativa, en Gimasur podemos ayudarte con la planificación del muestreo dentro del PPCL/PSL, la toma de muestras y la coordinación con laboratorio para obtener resultados fiables.

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Fuentes: https://www.sanidad.gob.es/fr/normativa/audiencia/docs/RD_prevencion_legionelosis.pdf